目的探讨2种不同面积培养皿对人脐带间充质干细胞（hUC-MSCs）收获量和生物学特性的影响。方法采集4条新鲜脐带，采用组织块法分离脐带组织，分别用底面直径15 cm（A组）和底面直径10 cm（B组）的培养皿进行贴壁培养，收集原代细胞，比较2组平均面积原代细胞收获量。每株细胞实验重复5次，取中间3个实验结果计算平均值。分别收集细胞培养至P1代和P2代，统计2组细胞收获量并绘制增殖曲线，检测表面标志物、三系分化潜能和免疫调节能力。结果A组单位面积收获的原代细胞量［（29 030.00±568.30）cm -2］明显高于B组［（14 799.25±409.30）cm -2］，差异有统计学意义（P<0.001)。A、B组T淋巴细胞增殖［分别为（3.05±0.90）%、（3.00±1.23）%］均低于对照组［（13.36±2.11）%］，差异均有统计学意义（P<0.05)。A、B组P2代次的Th1型细胞因子TNF-α比例［分别为（9.96±4.45）%、（9.91±3.36）%］均低于对照组［（37.84±11.51）%］，差异均有统计学意义（P<0.05）。A、B组Th1细胞分泌的细胞因子IFN-γ［分别为（0.72±0.18）%、（0.78±0.32）%］均低于对照组［（3.09±0.70）%］，差异有统计学意义（P<0.05）。A、B组P2代次的Th17型细胞因子IL-17A［分别为（0.21±0.13）%、（0.20±0.08）%］均低于对照组［（1.88±0.37）%］，差异均有统计学意义（P<0.05）。 A、B组CD4 +CD25 +FoxP3 +细胞比例［分别为（2.41±0.32）%、（2.69±0.40）%］均高于对照组［（0.51±0.10）%］，差异有统计学意义（P<0.05）。结论相同接种密度条件下，直径15 cm培养皿单位面积收获的原代细胞量更多，优化了培养过程的效率和经济性，减少了塑料制品的消耗，保护了环境。